Институт аллергологии и клинической иммунологии.
Тест-система Аллерго-скрин
Аллерго-скрин — это современная тест-система для определения аллерген-специфических иммуноглобулинов Е (IgE) в сыворотке крови человека.
Метод определения: иммуноблоттинг Страна-изготовитель: Германия
Результаты теста дают возможность судить о степени чувствительности человека к тому или иному аллергену. Заключение о наличии или отсутствии аллергического заболевания делает врач-аллерголог, учитывая не только полученные при этом исследовании данные.
Основными преимуществами данного теста являются:
- быстрота выполнения,
- минимальный объем крови (менее 0,5 мл),
- одновременное тестирование с 20 аллергенами (в каждой панели),
- программная высокоточная обработка результатов,
- наилучшее соотношение цена-качество.
Возможно использование готовых панелей по 20 аллергенов в каждой:
| Панели | (нажмите на номер) | ||
| Смешанные аллергены: | №1 | №4 | |
| Ингаляционные аллергены: | №2 | №5 | |
| Пищевые аллергены: | №3 | ||
или панелей для визульной оценки 11 аллергенов или 11 комбинаций различных аллергенов (до 25 аллергенов на мембране):
Аллерго-скрин. Приниципы теста
При изготовлении (создании) теста специфические аллергены наносятся на поверхность тестовой нитроцеллюлозной мембраны кассеты. Когда проба сыворотки крови пациента наносится на тестовую нитроцеллюлозную мембрану кассеты и инкубируется при комнатной температуре, аллерген-специфические IgE-антитела, содержащиеся в пробе сыворотки крови, вступают в реакцию с аллергенами, нанесенными на тестовую нитроцеллюлозную мембрану кассеты и связываются с ними. Несвязанные аллреген-специфические IgE-антитела удаляются путем тщательной промывки.
После этого на тестовую нитроцеллюлозную мембрану кассеты наносятся антитела к человеческим иммуноглобулинам Е, меченные биотином, и инкубируются при комнатной температуре. Они вступают в реакцию с соотвествующими специфическими иммуноглобулинами Е, связавшимися после первой инкубации пробы сыворотки крови с соотвествующими аллергенами на тестовой нитроцеллюлозной мембране. Несвязавшиеся антитела к человеческим иммуноглобулинам Е удаляются путем тщательной промывки.
При нанесении на следующем этапе на тестовую нитроцеллюлозную мембрану кассеты стрептавидина, коньюгированного со щелочной фосфатазой, и инкубации при комнатной температуре, стрептавидин связывается с биотином, вступившим в реакцию с комплексом аллерген/аллерген-специфические иммуноглобулины Е, и оставшимся на тестовой нитроцеллюлозной мембране кассеты после предыдущей инкубации, а также с положительным контролем. Несвязавшийся стрептавидин-коньюгат удаляется путем тщательной промывки.
На следующем этапе при нанесении на тестовую нитроцеллюлозную мембрану кассеты субстрата и инкубации при комнатной температуре происходит специфическая ферментативная реакция окрашивания щелочной фосфатазы, что ведет к формированию преципитата на мембране кассеты — проявление полосок, каждая из которых соотвествует определенному аллергену. Интенсивность окрашивания полосок прямо пропорциональна содержанию (концентрации) специфических антител (иммуноглобулинов Е) в пробе сыворотки крови.
После полного высушивания мебраны кассеты производится оценка результатов теста с помощью специального устройства – Ридера (RAPID READER, Matest, Италия) - цифровой камеры, оснащенной специальной программой для компьютера.
С помощью данного устройства и программы получают цифровую фотографию тестовой нитроцеллюлозной мембраны кассеты и анализируют интенсивность окрашивания каждой полоски, проявившейся на тестовой нитроцеллюлозной мембране. Это позволяется получать количественное значение концентрации соответствующих специфических иммуноглобулинов Е в пробе сыворотки крови.
